01、文章背景简介
结肠炎相关癌症（CAC）是一种与慢性IBD相关的肠癌，包括溃疡性结肠炎（UC）和克罗恩病（CD）。结直肠癌（CRC）是一种世界性的恶性肿瘤，是全球第三大常见癌症致死原因，CRC的产生涉及环境多因素的累积，如饮食、大量饮酒、肥胖、缺乏运动以及遗传和非遗传因素，以往的研究表明，肠道微生物群失调可促进慢性炎症介导的疾病，如炎症性肠病（IBD）和CRC。越来越多的数据表明，健康人群和肠癌患者的肠道微生物群组成发生了明显变化，肠道菌群失衡或微生态失调可改变环境因素对CRC风险的影响，肠道屏障功能障碍伴随着肠道通透性增加，使细菌或其细胞壁成分脂多糖（LPS）易位到血液中，从而导致持续的全身炎症，进而增加肠癌发展的风险。据报道，肠癌患者的肿瘤组织和淋巴结转移过程LPS浓度均升高。新的研究表明，调节肠道微生物群及其代谢产物的不同方式，包括饮食干预、益生菌、益生元、抗生素、粪便微生物群移植，都可以预防肠癌的发展。
许多研究表明，植物源性多糖可以通过多种方式降低肠癌的风险，包括抑制炎症、调节肠道内环境平衡、改善肠道微生物群的组成和功能以及加强肠道屏障，灵芝（G．lucidum）是一种药用真菌，数百年来在我国及亚洲许多国家和地区都被用来刺激免疫系统，促进健康和延年益寿。灵芝多糖（GLP）是灵芝中最重要的生物活性成分之一，具有免疫调节、降血糖、抗氧化、抗衰老、抗癌等多种药理活性，大量研究表明天然或同质GLP可以通过多种机制对多种癌症（包括CRC）产生抗癌作用。
最近的一项研究表明，从灵芝子实体中分离纯化的同质GLP通过调节分化和通过CARD9－NF－κB信号通路抑制骨髓源性抑制细胞在脾脏和肿瘤组织中的积聚，增强了抗肿瘤免疫反应。此前报道，从灵芝破碎孢子中提取的粗GLP通过诱导自噬体积累和抑制MAPK／ERK信号介导的自噬通量，诱导HCT116细胞凋亡，抑制肿瘤生长。然而，研究GLP调节肠道微生物群对癌症的作用的研究依然非常有限。此外，GLP通过调节肠道微生物群对抗癌症的潜在分子机制尚不清楚。目前，只有一项研究报告称，粗GLP以及从绞股蓝中提取的皂苷可调节肠道菌群和宿主免疫反应，以减少ApcMin ／＋小鼠的炎症和息肉形成。
2021年6月，浙江中医药大学药学院Cuiling Guo等人在《Carbohydrate Polymers》（高分子科学1区，IF＝9．381），发表了题为“Ganoderma lucidum polysaccharide modulates gut microbiota and immune cell function to inhibit inflammation and tumorigenesis in colon”的文章。本文中，作者团队研究的目的是确定去除孢子的灵芝多糖（GLP）在抑制AOM／DSS治疗小鼠结肠炎和结肠炎相关CRC肿瘤发生中的作用，并进一步研究肠道微生物群是否会影响这种反应。此外，研究还检测GLP在LPS诱导的RAW264．7巨噬细胞和肠上皮HT－29和NCM460细胞炎症和巨噬细胞活化中的作用，为GLP作为一种有希望的预防和治疗CRC的候选药物提供了科学依据。
02、所用到的主要方法
1、多糖的制备和表征：多糖提取，总碳水化合物和蛋白质含量的测定，分子量的测定，单糖组成分析，傅里叶变换红外光谱分析
2、动物实验
3、细胞实验
4、H＆E和IHC染色
5、qRT－PCR
6、Western－blot
7、ELISA和MPO活性测定
8、免疫荧光分析
9、DNA提取、16s rRNA基因扩增和测序
10、生物信息学肠道微生物群分析
11、粪便SCFAs测定
12、免疫荧光分析
03、文章主要内容摘要
本研究从去除孢子的灵芝孢子中提取水溶性多糖（GLP），其对AOM ／DSS诱导的炎症、肿瘤发生和肠道微生物群修饰的影响，这在以前从未报道过。研究数据显示，GLP（200和300mg／kg）降低了AOM／DSS诱导的结肠炎和肿瘤发生，表现为疾病活动指数评分显著降低，肿瘤总数和大小显著减少。此外，GLP通过抑制TLR4／MyD88／NF－κB信号传导，改善AOM／DSS诱导的微生物群失调，增加短链脂肪酸的产生，减轻内毒素血症。此外，GLP显著改善了肠道屏障功能，杯状细胞数量增加、MUC2分泌和紧密连接蛋白表达也证明了这一点。GLP治疗抑制巨噬细胞浸润，下调IL－1β、iNOS和COX－2的表达。此外，GLP抑制巨噬细胞RAW264．7、肠道HT－29和NCM460细胞中脂多糖（LPS）诱导的炎症标记物和MAPK（JNK和ERK）的激活。综上所述，这些结果表明：灵芝水溶性多糖GLP是一种很有前景的治疗结直肠癌的益生元。
