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文章背景简介
BACKGROUND INTRODUCTION
p53是最著名的肿瘤抑制基因，在40％的人类肿瘤中都可以看到突变及功能降低。因此，p53靶向疗法中，一些已经进入临床试验，有的则已经上市。其中，2003年，深圳市赛百诺基因技术有限公司研发的p53腺病毒注射液“今又生（Gendicine）”被我国食品药品监督管理局批准为一类新药上市，这也是世界首个获准上市的基因治疗药物，但上市后始终存在很大争议。
MDM2（Murine double minute 2）是一种具有E3泛素连接酶活性的蛋白，可泛素化降解p53，在大约2％的肿瘤中都发现存在MDM2基因扩增。MDM2扩增和p53突变通常是人类癌症中不同时出现（互斥存在）的基因改变。这表明在p53基因未发生突变的情况下，MDM2扩增可能足以使癌细胞逃脱TP53的肿瘤抑制作用。然而，p53信号通路的大多数基因在人类癌症中很少发生突变。因此，人类癌症如何在p53或MDM2基因不改变的情况下逃脱p53依赖的肿瘤抑制仍是一个未解之谜。
全基因组关联研究已经确定了人类基因组中许多癌症相关的位点，它们可能编码关键的肿瘤抑制功能。其中，CDKN1A位点是p53发挥抑癌作用的主要靶点。在人类癌症中，该位点的p21蛋白编码基因本身很少发生突变，而且转基因小鼠模型表明，即使p21蛋白缺失，p53肿瘤抑制通路也能保持完整。这表明，CDKN1A位点中编码p21蛋白之外的元素，可能负责该位点的肿瘤抑制功能。
DINO为位于CDKN1A位点的lncRNA（长链非编码RNA）基因。2021年，美国纽约斯隆凯特林纪念癌症中心的 Christina B Marney等人，在《Cell reports》杂志（IF 9．423；细胞生物学1区）发表了题为“p53－intact cancers escape tumor suppression through loss of long noncoding RNA Dino”的文章。他们的研究结果证实，lncRNA DINO是p53依赖性肿瘤抑制途径中一个关键的单倍体剂量不足型抑癌基因。LncRNA DINO结合p53蛋白，增加p53的稳定性，并增强p53信号通路。在人类癌症中，DINO基因高甲基化与TP53基因突变往往互斥存在，高甲基化使DINO基因沉默，导致p53蛋白稳定性下降，从而削弱p53信号通路。因此，DINO编码一种对肿瘤抑制至关重要的lncRNA，该lncRNA在人类癌症中经常被沉默，成为癌细胞逃避p53依赖性肿瘤抑制的分子机制。
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所用到的主要方法
METHODS
1． B细胞分离
2．定量RT－PCR
3．蛋白质半衰期分析与western blotting
4． 肿瘤同种异体移植
5． TCGA样本的计算分析
6．DNA甲基化分析
7．DINO杂合性丢失
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文章主要内容摘要
ABSTRACT
许多长链非编码RNA （lncRNA）基因存在于基因组的癌症相关位点附近，然而目前仍缺乏将lncRNA功能与癌症中常见的遗传学改变关联起来的证据。基因组中的DINO／CDKN1A位点是一个癌症相关位点，编码产物分别为lncRNA DINO和肿瘤抑制蛋白p21（基因名称CDKN1A）。在这篇文章中，报道了lncRNA DINO，在不依赖于p21的情况下抑制肿瘤的形成。DINO一个或两个等位基因的缺失会损害p53信号通路和细胞凋亡，导致在基因编辑小鼠肿瘤模型中出现单倍体不足肿瘤抑制表型。在人类癌症中，DINO／CDKN1A位点的一个特定区域经常发生高甲基化，沉默了DINO，但不会沉默p21的编码基因CDKN1A。高甲基化使DINO表达下降，继而导致p53蛋白稳定性下降，损害p53信号通路，并且DINO沉默与TP53基因改变互斥存在，提示DINO和TP53包含共同的肿瘤抑制模块。因此，DINO编码一种对肿瘤抑制至关重要的lncRNA，在人类癌症中经常被沉默，癌细胞以此作为逃避p53依赖性肿瘤抑制的机制。
